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選擇顯微鏡:專(zhuān)注于精確的功能

顯微鏡是世界上無(wú)數研究實(shí)驗室的主力,具有廣泛的功能,從常規細胞培養檢查到生成多層,高分辨率的納米級標本圖像。各種不同的顯微鏡平臺為現代系統的廣泛多功能性提供了便利,從而為這種豐富的應用提供了便利。這種多樣性加上傳統上提供顯微鏡的模塊化方式,可能會(huì )讓研究人員為他們的實(shí)驗室或核心設施購買(mǎi)新的顯微鏡而淹沒(méi); 雖然他們可以肯定他們理想的顯微鏡設置在某處,但挑戰在于識別它。在這里,我們將介紹在選擇**能滿(mǎn)足您的研究需求的成像解決方案時(shí)需要考慮的一些關(guān)鍵功能。

確定您的需求

確定您的需求并預測您將使用您的成像平臺執行的應用程序,包括您計劃在線(xiàn)上進(jìn)行的任何應用程序,將使選擇和決策過(guò)程更加順暢。

負責美國卡爾蔡司顯微鏡生命科學(xué)和學(xué)術(shù)產(chǎn)品營(yíng)銷(xiāo)的產(chǎn)品經(jīng)理Scott Olenych建議:“在您的腦海中清楚地了解您需要完成的應用和工作[使用成像設置]。優(yōu)秀的銷(xiāo)售代表將傾聽(tīng)您的需求。例如,如果您想進(jìn)行鈣成像,他們會(huì )將這些需求納入您的工作流程。明確定義應用程序是您邁出的**步。“

直立還是倒置?

當然,考慮您的預期應用和您希望查看的樣品將幫助您立即決定是否需要直立或倒置顯微鏡,其中光學(xué)器件分別位于樣品的上方或下方。奧林巴斯副產(chǎn)品經(jīng)理勞倫&midDOt;阿爾瓦倫加說(shuō):“另一件需要考慮的事情不僅僅是樣品本身,而是你的樣品將是什么樣的容器或容器。” “這對于幫助您選擇直立或倒置顯微鏡也很重要。如果您的目的是用燒瓶或塑料盤(pán)子成像,那么您將需要一臺倒置的顯微鏡,并且具有長(cháng)工作距離的物鏡,以適應您的容器厚度。“

顯微鏡領(lǐng)域的一個(gè)有趣的新人是ECho Laboratories的Revolve顯微鏡,它不需要在直立或倒置之間進(jìn)行選擇。這種混合平臺可以相對快速,輕松地在兩種成像模式之間切換,如果您需要兩種類(lèi)型的儀器但空間不足,它還可以為您的實(shí)驗室騰出空間。

光學(xué)

分辨率 - 您查看內容的詳細程度以及圖像分辨的速度 - 是另一個(gè)重要的考慮因素。

McCrone集團的儀器部門(mén)McCrone Microscopes&Accessories總裁Jeff McGinn強調,目標是**關(guān)重要的:“物鏡上的數值孔徑(NA)越高,其分辨能力越強。除了預算之外,我們還會(huì )根據客戶(hù)想要看到的細節數量來(lái)評估客戶(hù)NA。“除了NA之外,還要看看顯微鏡物鏡提供的球面和色差的校正。

在任何預算限制方面,Alvarenga建議:“選擇你能買(mǎi)得起的**好的物鏡。物鏡的質(zhì)量將直接影響您的數據質(zhì)量,因此這是一個(gè)非常重要的考慮因素。“那么您就擁有了針對特定技術(shù)設計的物鏡,例如相位對比或帶硅光學(xué)的延時(shí)成像。在濕實(shí)驗室環(huán)境中通常需要相襯,尤其是進(jìn)行細胞計數或活力測定的實(shí)驗室。還要看工作距離(或WD,鏡頭和樣品之間的空間),以及它是否與您的樣品類(lèi)型兼容。

發(fā)現

顯微鏡光路的另一個(gè)重要部分是用于檢測樣品信號的收集裝置。

“相機技術(shù)正在迅速發(fā)展,”Olenych說(shuō),他看到對基于CMOS的相機芯片的需求增加,而不是更傳統的CCD技術(shù)。他解釋說(shuō),CMOS芯片“尺寸通常比CCD芯片大,并且具有更高的靈敏度。它們具有更多的像素,這意味著(zhù)更小的區域可以更詳細地成像。“光電倍增管或PMT也是不需要空間分辨率的應用中的一種選擇。此外,由于PMT不存儲電荷并在幾納秒內響應輸入光通量的變化,因此它們可用于檢測和記錄極快的事件。

可用性

可能影響您決策的另一個(gè)因素是系統的可用性。儀器的用戶(hù)友好性在很大程度上取決于其軟件界面。“奧林巴斯軟件在其所有系統中都非常普遍,這減少了在新系統中找到方法或教導新人進(jìn)入實(shí)驗室所需的時(shí)間,”Alvarenga說(shuō)。一些顯微鏡開(kāi)發(fā)人員已經(jīng)引入了依賴(lài)觸摸屏技術(shù)來(lái)控制儀器的直觀(guān)界面。例如,ECho Laboratories的Revolve由iOS應用程序控制,該應用程序具有縮放縮放功能,可以在單擊中對單元格進(jìn)行計數。“可用性曾經(jīng)是圖騰柱上**低的,但它對用戶(hù)來(lái)說(shuō)變得越來(lái)越重要,”ECho實(shí)驗室**執行官兼創(chuàng )始人Eugene Cho解釋道。

選擇供應商

“選擇一臺顯微鏡真的歸結為選擇合適的公司,”Olenych建議道。除了研究不同供應商的產(chǎn)品之外,區分哪個(gè)公司的**佳方法之一是向同事尋求建議。請記住,你正在與這家公司建立持續的合作關(guān)系,因此找到適合自己的公司**關(guān)重要。

哈佛醫學(xué)院神經(jīng)生物學(xué)成像設施的核心設施經(jīng)理兼**成像專(zhuān)家Michelle Ocana在選擇供應商方面擁有豐富的經(jīng)驗。一般來(lái)說(shuō),她會(huì )接近少數不同的供應商。“**少有兩個(gè),但多達五個(gè),取決于產(chǎn)品,”她解釋道。“我也試著(zhù)聯(lián)系我以前從未處理過(guò)的供應商,這樣我就可以看一下新產(chǎn)品并了解客戶(hù)經(jīng)理。”然后Ocana邀請每位銷(xiāo)售代表進(jìn)入該部門(mén),提供一個(gè)關(guān)于設備并回答研究人員提出的問(wèn)題。“然后我會(huì )和他們坐下來(lái),我們將進(jìn)行一對一的討論以討論細節。”

演示

在做出**終選擇之前,您還應該使用自己的樣本演示一個(gè)系統,“這樣您就可以了解樣本如何真正與特定儀器進(jìn)行交互,”Alvarenga說(shuō)。

“當你進(jìn)入決策過(guò)程的演示部分時(shí),你應該已經(jīng)對光路和技術(shù)的設計方式感到滿(mǎn)意,”Ocana說(shuō)。“你真正需要做的是評估系統在硬件和軟件方面是否穩定。”她建議你將平臺演示幾天并將其推向**極限:“我們通常會(huì )演示一些東西一次一個(gè)星期。那個(gè)星期,我們廣泛使用這些設備; 我們試圖打破它,所以我們可以看到它在何時(shí)何地發(fā)生故障,以及供應商如何快速修復它。“她解釋說(shuō)這是一個(gè)很好的跡象,表明公司和銷(xiāo)售代表將如何繼續支持你儀器的壽命。

持續的支持

購買(mǎi)顯微鏡是更大工藝的**步。“一旦你的實(shí)驗室安裝了一個(gè)系統,重要的是你要學(xué)會(huì )關(guān)心它,以便它在未來(lái)幾年繼續保持**佳性能,”Alvarenga分享道。許多著(zhù)名的制造商提供培訓計劃,無(wú)論是在您的機構現場(chǎng)還是在他們自己的教學(xué)實(shí)驗室。

還提供延長(cháng)保修計劃,以幫助降低與此次大額購買(mǎi)相關(guān)的維護成本。但并非每種工具都需要它們。Ocana有這樣的建議:“**終歸結為計時(shí):你的系統可以停機多長(cháng)時(shí)間?如果您需要**快的周轉時(shí)間讓您的系統重新啟動(dòng)并運行,那么您應該進(jìn)行保修。“

**后一句話(huà)

有許多顯微鏡選項和功能供科學(xué)家選擇。有時(shí),選擇可能是壓倒性的。**好的方法是進(jìn)行研究,比較儀器,考慮您當前的需求并為未來(lái)做好計劃。**后,正如McGinn所說(shuō):“顯微鏡是有趣的科學(xué); 我們喜歡看到肉眼無(wú)法看到的東西,發(fā)現我們不知道的東西。“

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